کلونینگ وتعیین (hsp70 (c-terminal از مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در وکتور بیانی pqe-30
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان البرز - دانشکده کشاورزی
- نویسنده فاطمه نیک نفس
- استاد راهنما سیدمحمود ابراهیمی غلامرضا بخشی خانیکی
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1389
چکیده
پروتئینهای شوک حرارتی (hsp) ،از مایکو باکتریوم توبرکلوزیس، توسط سلولهای t شناسایی می شوند و لذا می توانند در همراهی با آنتی ژنهای مناسب پاسخ ایمنی قابل قبولی را بر علیه عفونتهای ویروسی، عفونتهای باکتریال و یا سایر عوامل عفونی القا نمایند. مهمترین دلیل ما نیز برای استفاده از ( c-terminal )hsp70 359-610 ،خاصیت adjuvant قوی این بخش از مولکول hsp70 است. این مولکولها می تواند پاسخ سلولهای ایمنی را افزایش دهند ؛علاوه براین می توانند باعث پیشرفت اثرات درمانی تولید شده بوسیله واکسنهای نوترکیب شوند. ما در این تحقیق در مرحله اول ، اقدام به طراحی پرایمر برای جداسازی ژن hsp70 از باکتری سل نمودیم. پس از بهینه نمودن شرایط pcr ،با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ،قطعه ( c-terminal )hsp70 359-610 مورد نظر تکثیر گردید ؛سپس بر روی ژل 1% برده شد،تخلیص گردید و پس از تخلیص قطعه مورد نظر از روی ژل 1%به کمک تکنیک t/a وکتور بداخل وکتور ptz57r/t dna کلون گردید .در نهایت هضم آنزیمی وکتور بیانی pqe-30 وبطور جداگانه وکتور کلونینگ ptz57r/t dna که حاوی قطعه مورد نظر ماست بوسیله آنزیمهای, bamhi hindiii انجام گرفت که در نتیجه آن وکتور pqe-30 به حالت linear در آمد ونیز قطعه ( c-terminal )hsp70 359-610 از داخل وکتور کلونینگ فوق بیرون کشیده شد .سپس عمل ligation میان وکتورpqe-30 و dnaتخلیص شده از ژل انجام شد و سرانجام آنالیز پلاسمید نوترکیب با استفاده از هضم آنزیمی ،تائید کلونینگ (تایید اولیه با استفاده از ژل الکترو فورز و تایید نهایی با استفاده از pcr )و در آخر تعیین توالی ژن hsp70 صورت گرفت ؛ پس از کلون شدن ژن hsp70 درون پلاسمید pqe-30 منطقه مورد نظر (منطقه واقع بین دو جایگاه , bamhi hindiii) تعیین توالی شد.درنهایت صحت و انطباق کلونینگ ژن با pcr ، هضم آنزیمی و تعیین توالی ژن تایید شد.
منابع مشابه
کلونینگ تعیین توالی ژن m2e ویروس آنفلوآنزای تیپ a سوش ( h9n2 ) به همراه ژن hsp70(c-ter)مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در شاتل وکتور بیانی غیر ترشحی ppiczb
یکی از دلایل استفاده از پروتئین m2e برای ساخت واکسن آنفلوانزا a توانایی منحصر به فرد آنهاست. از این رو برای افزایش مقاومت و ایمنی یک راه موثر مصون باقی ماندن پروتئین m2e است. به نظر می رسد که ما می توانیم با اتصال این m2e-peptide به یک ناقل مناسب مانند hsp70(c-ter) مایکوباکتریوم توبرکلوزیس آن را مقاوم کنیم. بنا بر گزارشات قبل ،این تحقیق در نظر دارد از ترکیب پروتئین m2e از ویروس آنفلوانزا a با ...
15 صفحه اولطراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspX و tb 10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس
هدف: سل از مهمترین بیماریهای عفونی و از شایعترین علل مرگ و میر در دنیا خصوصاً در کشورهای در حال توسعه میباشد که توسط مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایجاد میشود. طراحی و ساخت واکسن های جدید بر علیه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس تنها راه موثر در پیشگیری و کنترل آن میباشد. هدف از این مطالعه طراحی و ساخت کلونینگ وکتور با استفاده از فیوژن ادغام دو ژن hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس میباشد. مواد ...
متن کاملطراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspx و tb ۱۰.۴ مایکوباکتریوم توبرکلوزیس
هدف: سل از مهم ترین بیماری های عفونی و از شایع ترین علل مرگ و میر در دنیا خصوصاً در کشورهای در حال توسعه می باشد که توسط مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایجاد می شود. طراحی و ساخت واکسن های جدید بر علیه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس تنها راه موثر در پیشگیری و کنترل آن می باشد. هدف از این مطالعه طراحی و ساخت کلونینگ وکتور با استفاده از فیوژن ادغام دو ژن hspx و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می باشد. مواد و...
متن کاملساب کلونینگ ژن زیرواحد آلفای هورمونهای گلیکوپروتئینی بخش پیشین غده هیپوفیز در یک وکتور بیانی سلولهای پستانداران
سابقه و هدف: هورمونهای گلیکوپروتئینی مترشحه از هیپوفیز قدامی شامل هورمونهای گلیکوپروتئینی انسانی شامل هورمون محرک تیروئید، هورمون لوتئینیزه کننده، هومون محرک فولیکولی و گونادوتروپین کوریونی هستند که هر یک از دو زیرواحد آلفا و بتا تشکیل شده است. زیرواحد آلفا در همه هورمونهای فوق مشابه است و از چهار اگزون و سه اینترون تشکیل شده است. زیر واحد بتا مسئول فعالیت اختصاصی هر یک از این هورمونها...
متن کاملمقایسه مدل ژنتیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس بیجینگ با سایر سویههای مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با استفاده از روش MIRU-VNTR
زمینه: اخیراًٌ نشان داده شده است که سوشهای مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ژنوتایپ بیجینگ، رابطه مستقیمی با مقاومت دارویی دارند. بنابراین روشی ساده و سریع برای تشخیص و تمایز ایزولههای خانواده بیجینگ مورد نیاز میباشد. هدف از این مطالعه، ارزیابی قدرت تمایز لوکوسهای مختلف دو روش 15 MIRU-VNTR و 12 MIRU-VNTR برای سویه-های بیجینگ و مقایسه آن با سایر سویههای مایکوباکتریوم توبرکلوزیس میباشد. مواد و روشها...
متن کاملبررسی موتاسیون های ژن rpoB مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس جدا شده از بیماران شهر تهران
سابقه و هدف: مایکوباکتریوم توبرکلوزیس باکتری عامل بیماری سل است که سالانه حدود 2 میلیون نفر بر اثر ابتلا به این بیماری جان خود را از دست می دهند. وجود باکتری های مقاوم به دارو های ضد سلی از عوامل مهم مرگ افراد مبتلا به سل است. از جمله مهم ترین این داروها، داروی ریفامپیسین است که به نظر می رسد مکانیسم عملکرد این دارو، دخالت در فرایند رونویسی از طریق اتصال به زیرواحد β آنزیم RNA پلیمر از می باشد....
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان البرز - دانشکده کشاورزی
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023